產品特點：
精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）要用于成年男性精子核蛋白的染色，便于醫生顯微鏡下觀察成熟精子及計算不成熟精子比例。評估精子成熟率對生育的影響。
本試劑無須特殊儀器，簡單、快速、準確。
包裝規格：20人份/盒、40人份/盒。
精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）的詳細資料：
【精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）品 名】
精子權威五聯檢：精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）
【研發依據】
正常情況下，與精核DNA結合的堿性蛋白（核蛋白）將經歷從組蛋白到魚精蛋白的自然成熟過程，這種成熟后的魚精蛋白對精子基因（DNA）具有特殊保護作用。
組蛋白被魚精蛋白逐漸取代的過程，稱之為精子核蛋白組型轉換，這種組型轉換具有重要的生理意義。但當核蛋白組型轉換異常可引起男性不育或胚胎早期夭折流產，其機理為：①精子DNA不穩定且易受損傷而難以受孕；②一旦受精，由于核蛋白組型異常，精子核不能正常解聚，從而影響了雌雄原核的融合；③胚胎不能正常發育，造成胚胎夭折而流產。
【精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）預期用途】
主要用于成年男性精子核蛋白的染色，以此評估成年男性精子成熟比例，可評價男性生育功能。
【試劑特點】無須特殊儀器，簡單、快速、準確。
【精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）檢驗原理】
成熟精子的核蛋白成份為魚精蛋白，富含精氨酸和胱氨酸殘基；不成熟精子的核蛋白成份為組蛋白，富含賴氨酸殘基。酸性條件下，苯胺藍與賴氨酸殘基結合生成紫藍色化合物，從而指示不成熟核蛋白的存在，而核蛋白成熟的精子則染成紅色。
【組成成份】
試劑主要由苯胺藍、氧雜蒽、冰醋酸、磷酸鹽緩沖液等配制而成。
規格
組 份
20人份/盒
40人份/盒
A液（10×濃縮洗滌液）
10ml×1瓶
20ml×1瓶
B液（固定液）
5ml×1瓶
10ml×1瓶
C液（染色液）
5ml×1瓶
10ml×1瓶
D液（10×濃縮洗脫液）
10ml×1瓶
20ml×1瓶
E液（復染液）
5ml×1瓶
10ml×1瓶
防脫載玻片
20片
40片
說明書
1份
1份
【樣本要求】液化后的新鮮精液標本
【精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）操作方法】
1．試劑的準備
1）洗滌工作液的配制：A液（10×濃縮洗滌液）以蒸餾水10倍稀釋，4℃保存備用；
2）洗脫工作液的配制：D液（10×濃縮洗脫液）以蒸餾水10倍稀釋，4℃保存備用。
2．樣本準備
1）新鮮精液標本置于37℃恒溫水浴箱中完全液化。
2）精子的洗滌及稀釋，方法如下： ①在Eppendorf管中加入0.2—0.5ml的精液和洗滌工作液1ml，以一次性吸管反復吹打精子數次后，2000轉離心5min，棄去上清液，保留管底精子沉淀團； ②在Eppendorf管中加入洗滌工作液1.5ml，以一次性吸管反復吹打精子數次后，2000轉離心5min，棄去上清液，保留管底精子沉淀團； ③再次重復②的操作，離心結束后，棄去上清液。④在Eppendorf管中加入洗滌工作液約0.1—0.2ml，混合精子懸液。
3．檢測步驟
1）取上述已制備好的精子懸液15μl，均勻涂布于防脫載玻片上，自然干燥。
2）在涂有待測精子的涂片區內，滴加B液（固定液）2—3滴，室溫反應2min。
3）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區內的精子），甩去多余水份（注意防止涂片干燥）。
4）在涂有待測精子的涂片區內，滴加C液（染色液）2—4滴，室溫反應5min。
5）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區內的精子），并甩去多余水份（注意防止涂片干燥）。
6）將載玻片豎直插入已盛有洗脫工作液的反應池中，使待測標本涂片區完全浸沒于洗脫工作液中，室溫反應5min。
7）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區內的精子），并甩去多余水份（注意防止涂片干燥）。
8）在涂片區內滴加E液（復染液）2—4滴，室溫反應5min。
9）以流水輕輕沖去載玻片上的試劑（注意控制水流速度，以免洗脫涂片區內的精子），迅速吹干玻片。（如果需要長久保存該涂片樣本，可選擇完成以下脫水步驟：分別將組織片依次置于70、90和100乙醇中各2min，晾干。）
10）鏡檢。
【精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）染色結果】
核蛋白不成熟的精子染色呈紫藍色或紫色，核蛋白成熟的精子染色呈紅色。
【參考值】 DFI（單鏈DNA精子）＜10為正常；當DFI＞25時，受精率＜20。
【精子核蛋白染色試劑盒（苯胺藍染色法）注意事項】
1．受試者應按照WHO技術規范采集精液標本。
2．若精液標本粘稠度高或液化不完全，可導致檢測結果非特異性假陽性。需要預先降低精液粘度或促進精液完全液化后，才能用于檢測。
3. 精子密度過高可能導致脫色不均勻，從而對檢測結果產生不良影響；精子密度過低則不會影響檢測結果；涂片時應避免涂布過于稠密。
4. 精子洗滌不充分可影響顯微鏡觀察結果。
5. 染紫藍色精子為核蛋白不成熟精子，染紅色精子為核蛋白成熟的精子。由于精子核蛋白存在組蛋白-魚精蛋白的過渡期，因此此類精子頭部呈淡藍色或紫色；精子頭部局部染淡藍色或紫色、頂體膜邊緣染紫藍色，均是精子不夠成熟的表現。
6. 鏡下觀察結果時，不要在精子堆集分布的區域計數，應選擇精子散在分布的區域進行計數。
7. 受檢者所有樣品均應視為潛在的傳染源，檢測完畢的樣本、試劑均須作為醫療廢物處理，避免污染環境。
8．精子核蛋白染色試劑盒為體外診斷試劑，檢測結果僅供臨床參考，對患者的臨床管理應結合其癥狀/體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應等情況結合考慮。
規 格：20人份/盒、40人份/盒
存儲條件及有效期：試劑盒于2-8℃避光保存，有效期12個月
>> 酸性磷酸酶染色液
